Expresión de la catepsina D en epitelio escamoso cervical y neoplasia cervical intraepitelial / Cathepsin D expression in cervical squamous epithelia and cervical intraepithelial neoplasia

Objetivo: Determinar las positividades mediante técnicas inmunohistoquímicas de la catepsina D (CD) en nuestras muestras así como la intensidad y localización en el espesor del epitelio de los casos positivos para este marcador. Material y métodos: Nuestro estudio está formado por 113 muestras de tejido cervical divididas en 4 grupos: 30 casos de epitelio escamoso cervical normal (CC), 31 de neoplasia cervical intraepitelial grado 1 (CIN1), 27 de neoplasia cervical intraepitelial grado 2 (CIN2) y 25 de neoplasia cervical intraepitelial grado 3 (CIN3). Se obtienen cortes de tejido, tras su fijación e inclusión en parafina, en los que se aplica una técnica inmunohistoquímica específica para la detección de la CD. Resultados: La distribución de las positividades de este marcador fueron 0 por ciento para el CC, 48 por ciento para el CIN1, 33 por ciento para el CIN2 y 44 por ciento para el CIN3, con p= 0,00001 en la relación CC-CIN1, p = 0,0005 en la relación CC-CIN2 y p = 0,00005 en la relación CCCIN3 (el nivel de significación estadística aplicado ha sido del 5 por ciento). La diferencia en la distribución de las intensidades fue significativa en el grupo de tinción intensa: 6,6 por ciento para CIN1, 0 por ciento para CIN2 y 45 por ciento para CIN3 (p = 0,0476). Conclusión: La expresión de la CD en un alto porcentaje de CIN1 puede atribuirse a su función estimuladora de la mitosis, así como el aumento de intensidad en los CIN3 podría indicar la adquisición temprana de alteraciones propias del fenotipo metastásico. Son necesarios estudios posteriores para sentar como base de la oncogénesis cervical nuestras conclusiones (AU)

Intensidade dos receptores de estrogênio em fragmentos dfa mucosa vaginal / Estrogen receptors in biopsy of vaginal mucosa

OBJETIVOS: avaliar a presença e a intensidade dos receptores estrogênicos citoplasmáticos em biópsias da mucosa vaginal.MATERIAL E MÉTODOS: realizadas biópsias em 49 mulheres normais no menacme, atendidas para tratamento de procidências das paredes vaginais ou de prolapso genital. Os fragmentos de epitélio vaginal foram processados por método imunocitoquímico (PAP). As diferentes coloraçoes obtidas foram correlacionadas ao grau de intensidade dos receptores de estrogênio do citoplasma (zero, + a ++++). Os receptores proteicos específicos ao estrogênio foram identificados no citoplasma das células que compoem as três camadas celulares do epitélio vaginal (CP - camada profunda, CI - camada intermediária e CS - camada superficial). RESULTADOS: A CI possui maior intensidade de REc. Em mulheres com citologia esfoliativa vaginal compatível com o perfil endócrino e adequada à faixa etária, a intensidade dos REc das células da CI nao dependem das oscilaçoes hormonais plasmáticas, nem da faixa etária. As pacientes muito jovens (idade entre 11 e 15 anos) tiveram maior incidência de REc nas células da camada intermediária do que as mulheres que cursam o período final da idade reprodutiva (idade entre 40 e 45 anos). A correlaçao entre a intensidade dos REc observados nas células das três camadas do epitélio vaginal de mulheres no menacme e os índices de maturaçao da citologia vaginal nao resultaram em valores estatisticamente significativos. CONCLUSOES: O epitélio vaginal das mulheres, um sensível efetor estrogênico, presta-se para a identificaçao e valorizaçao dos REc, desde que sejam considerados cada um dos fatores endócrinos, as diferentes fases do ciclo biológico da mulher, a faixa etária e as diferentes estruturas celulares que o compoem.

Morphogenesis of the epithelial cell transporting phenotype: systhesis and distribution of ion channels

The exchange of substance between higher organisms and the environment takes place across epithelia consisting of one or more cell layers. To perform this function, epithelial cells have two basic differentiated properties: 1) they form tight junctions (Tjs) that seal the extracellular space, and 2) they are polarized into an apical and a basolateral domain, with entirely different structural, biochemical and physiological properties. Our understanding of the mechanisms involved in the expression of these properties has been greatly enchanced by the availability of epithelial cell lines that form Tjs and polarize in vitro under conditions suitable for experimental control. In this article we summarize our studies on the synthesis and polarized expression of ion channels in epithelial cells. MDCK cells have four types of K+ channels in the apical domain, and a fifth one in the basolateral domain. The basolateral side also has a population of Cl- channels. Each type of channel is absolutely polarized. Harvesting with trypsin-EDTA reduces the area of the plasma membrane by 50 per cent and the channel population by 90 per cent. Upon plating, these channels are recovered within a few hours. We describe here the main extracellular and intracellular mechanisms involved in these phenomena.

Avaliaçäo colpocitológica de mulheres menopausadas com terapia de reposiçäo hormonal / Effects of hormonal replacement therapy on vaginal cytology in menopausal women

Avaliamos diferentes esquemas de terapêutica de reposiçao hormonal (TRH) e sua influência nos exames colpocitológicos em mulheres menopausadas. Foram estudadas 75 pacientes, com avaliaçoes colpocitológicas antes e depois da terapêutica, por um ano. Foram divididas em quatro grupos com diferentes esquemas de TRH (estrogênios conjugados O,625mg, valerianato de estradiol 2 mg, estriol 2 mg e benzoato de estradiol 5mg), um grupo sem tratamento serviu como controle. As pacientes que receberam estrogênios conjugados e valerianato de estradiol apresentaram maturaçao do epitelio vaginal mais significativo quando comparadas ao estriol, benzoato de estradiol e controle (p

Citotoxicidad inducida por el tabaco / Cytotoxic and proliferative effect of tobacco

El condensado de humo (CH) a una concentración de 0.40 mg/ml y el uretano a dosis de 5.0 mg/ml disminuyeron la adherencia y la proliferación celulares a porcentajes menores del 30 y 15 por ciento respectivamente, en comparación con las células controles que tuvieron 100 por ciento de adherencia y proliferación. El extracto de tabaco (ET) a una concentración de 16 mg/ml provocó 65 por ciento de inhibición de la proliferación; sin embargo, con 0.79 mg/ml, o dosis menores, los resultados fueron similares a los cultivos celulares testigos y con 0.1 mg/ml se incrementó la proliferación hasta 65 por ciento por arriba de las células testigo. El CH (0.5 mg/ml) dió valores semejantes en la adherencia y proliferación celulares con respecto a los controles. Las células MDCK tratadas con etilen-metanosulfonato y que después fueron expandidas en condiciones habituales, se incubaron con diferentes concentraciones del CH, ET y el uretano, observándose un comportamiento similar al de las celulas MDCK controles. Los cultivos celulares que se incubaron tres días posteriores a su enfrentamiento con el CH (0.05 mg/ml), o con el uretano (2 mg/ml), tuvieron el 50 por ciento de inhibición de la proliferación al compararlos con los cultivos controles. Los datos obtenidos en este trabajo indican que las dosis altas de los productos del tabaco son citotóxicas, reflejándose este hecho en la disminución de la adherencia y proliferación de las células y que las dosis bajas de los PDCT estimulan estos fenómenos celulare

Reconocimiento de residuos glicosídicos mediante lectinas conjugadas en esbozos de miembros de ave / Detection of glycoside residues in chicken limb bud using conjugate lecitines

El esbozo de miembro cuenta con un núcleo mesenquimático cubierto por un epitelio ectodérmico, los que experimentan interacciones, durante el desarrollo, conducentes a la formación de una extremidad normal. En los últimos años, utilizando la técnica de lectinas-HRP, se han estudiado la distribución y el significado de residuos glicosídicos en las interacciones epitelio-mesenquimáticas que ocurren durante la organogénesis. Así, se han identificado y caracterizado los cambios que experimentan diversos glicoconjugados en la diferenciación, reconocimiento e interacciones celulares en diversos sistemas embrionarios. Para conocer estos aspectos, hemos utilizado embriones de pollo con diferentes edades (72, 92, 120 y 168 horas), que sirvieron como dadores de los esbozos de miembros. Este material fue sometido a técnica histológica corriente y a la técnica lectinas, utilizando las siguientes lectinas-HRP:UEA (ulex europaeus agglutinin), DBA (dolichos biflorus agglutinin), ECL (erithyna cristagalli lectin), RCA (ricinus communis agglutinin), LTA (lotus tetragonolobus agglutinin), BSL (Bandeiraea simplicifolia lectin), SBA (glycine max agglutinin), además, sus respectivos inhibidores, para verificar la específidad de cada lectina. Los resultados mostraron existencia de varios residuos glicosídicos, siguiendo un patrón cambiante a lo largo, tantro a nivel del epitelio, como del mesénquima. Se analiza el siginificado de los resultados y se concluye que los patrones glicosídicos detectados peden tener algún significado en el proceso de diferenciación del esbozo en estudio.

Participación del citoesqueleto en la fisiología del endometrio / Cytoskeleton participation in endometrium physiology

En el endometrio el citoesqueleto participa en todas las funciones mecánicas de la célula, en el movimiento y reacomodo de organelos y proteínas solubles y en el metabolismo en general. El epitelio endometrial por su morfología y aparente homogeneidad celular, se ha estudiado más que el estroma. Se sabe que los filamentos intermedios muestran un patrón característico típico de la clase celular. Durante la preñez y la pseudopreñez, en la región apical de las células epiteliales tanto luminales como glandulares predomina la queratina sobre la región basolateral, en tanto que la vimetina solo se encuentra en las células epiteliales luminales, y se incrementa el día de la implantación. En humanos y roedores, la desmina solo se expresa en la decidua. Se piensa que los filamentos intermedios, participan en la difusión de proteínas de membrana cambiando la polaridad. Los microfilamentos intervienen en la regulación de la forma y movilidad celular. En el epitelio luminal participan en las transformaciones de la superficie uterina, como son las microvellosidades. Al sistema de microtúbulos (MT) en el endometrio y otros órganos se le ha relacionado con la psisción y movimiento de orgánulos como son los lisosomas, mitocondrias o aparato de Golgio; además se ha demostrado que los MT también intervienen en la síntesis de DNA, ya que drogas como la colchicina impiden estos fenómenos

Scanning electron microscopic study of the epithelial cells and surface of interface epithelium-connective tisue of the palatine mucosa of nine-banded armadillo, dasypus novemcintus

Las características de las células epiteliales y de la superficie de interfase del tejido conectivo-epitelial de la mucosa palatina del armadillo (dasypus novemcintus), se estudiaron usando el microscopio electrónico de barrido. La mucosa del paladar duro está cubierta por epitelio queratinizado escamoso estratificado, que tiene algunas células epiteliales poligonales en proceso de escamación. La mucosa palatina mostró proyecciones puntiagudas de alturas diferentes, con diámetros de 100-200 µm. La lámina propia revela abundante tejido conjuntivo papilar digitiforme, que contiene un entramado de fibras colágenas. Fueron observadas numerosas coberturas de forma circular o elíptica de los conductos salivales de glándula. La superficie de las células epiteliales presentó gran cantidad de micropliegues

Morfometría de la diferenciación de células epiteliales mamarias en cultivo / Morphometric differentiation of mammary epithelial cells in culture

La diferenciación funcional del epitelio mamario requiere de hormonas específicas, factores de crecimiento y señales del medio ambiente celular. Estas últimas consisten en comunicación de sus células con la matriz extracelular e interacciones célula-célula, las cuales determinan un intrincado mecanismo que se traduce, finalmente, en eventos que conllevan a la secreción láctea. Células epiteliales mamarias de rata HC11, un subclon de la línea celular COMMA-1D de glándula mamaria en mitad de la preñez, fueron cultivadas en presencia de hormonas lactogénicas, insulina, dexametasona y prolactina y estimuladas con el factor de crecimiento epidérmico. En estas condiciones, las células se diferencian sintetizando ß caseína, demostrada mediante inmuno-blotting y filamentos intermediarios de citoqueratina, los cuales son evidenciados en micrografías electrónicas y con reacción inmuno-citoquímica con anticuerpos anticitoqueratina. Además, en estas células normales-proliferantes y diferenciales, fue realizado un estudio morfométrico, cuyos resultados correlacionan adecuadamente con los eventos morfológicos y bioquímicos observados en esta diferenciación del epitelio mamario de rata, en cultivo

Ultraestructure of the cortical segments of the nephron in guinea pig: cavia porcellus

Los segmentos corticales del nefron de cavia porcellus, están formados por glomérulos; tubos contorneados proximal y distal. Las capas parietal y visceral de la cápsula de Bowman son fácilmente identificables en el microscopio electrónico de transmisión. Los podocitos pueden estar relacionados con el coeficiente de ultrafiltración urinario y regulación de la filtración glomerular. Las células mesangiales presentan una posible función de secreción de renina, que actúa en la regulación de la presión arterial. Las células epiteliales que revisten los tubos contorneados proximales, presentan características ultraestructurales que reflejan la resorción de agua, sales y electrolitos

Caracterizaçäo imuno-histoquimica de ceratinócitos humanos epidérmicos e foliculares in vivo e in vitro / Immuno histochemistry characterization of human epidermics and follicular Keratnocytes in vivo and in culture

FUNDAMENTO - As citoqueratinas säo excelentes marcadores da diferenciaçäo das células epiteliais. OBJETIVO. Caracterizar a expressäo de citoqueratinas e filagrina em ceratinócitos in vivo e em cultura. MATERIAL E MÉTODOS - Ceratinócitos epidérmicos e foliculares (da bainha radicular externa), cultivados sob as mesmas condiçöes, e criocortes de couro cabeludo normal foram corados mediante a técnica APAAP, com 13 anticorpos monoclonais anticitoqueratinas e um antifilagrina. RESULTADOS In vivo, os ceratinócitos epidérmicos expressam as citoqueratinas 1,2,5,10 e 14, e os ceratinócitos foliculares, as citoqueratinas 5,6,14,16,17 e 19. Por outro lado, in vitro, ambas as subpopulaçöes de ceratinócitos demonstraram as mesmas citoqueratinas 2,5,6,14,16,17,19, embora a expressäo de 2 tenha sido mais intensa nos ceratinócitos epidérmicos. Em cultura, ambos expressam citoqueratinas que näo estavam presentes in vivo. O anticorpo monoclonal antifilagrina demarcou ambas as subpopulaçöes in vitro, e, in vivo, estava presente somente nos ceratinócitos epidérmicos. CONCLUSäO - Ceratinócitos de diferentes origens, da epiderme e do folículo piloso, adotam, em cultura, estágio intermediário de diferenciaçäo

Integrinas: mediadores de interacción entre células y matriz extracelular / Integrins: interaction mediators between cells and extracellular matrix

Se presenta una revisión actualizada sobre integrinas, glicoproteínas transmembrana, que unen selectivamente proteínas constitutivas de la matriz extracelular y que sincrónicamente se relacionan con filamentos del citoesqueleto, modulando de esta forma la morfología y fisiología celular. Se describe también, la expresión de estos receptores en la transformación de células epiteliales mamarias

Action of estrogen alone on the number of lysosomes in the rat endometrial epithelium

In order to determine the possible variations in the number of lysosomes in the glandular epithelium of endometrial cells of rats under estrogen action alone, the following groups of rats were studied: I, rats in estrous phase; II, oophorectomized rats; III, oophorectomized plus estrogen treated rats. Lysosomes were visualized by Gomori's method for acid phosphatase and counted by two researchers. The results obtained were statistically significant, with higher values in oophorectomized plus estrogen treated rats than in oophorectomized animals. Rats in estrous phase also presented a higher number of lysosomes than those of oophorectomized and not treated with estrogen

Avaliaçäo da permeabilidade epitelial pulmonar através da taxa de depuraçäo pulmonar do 99mTc-DTPA / Evaluation of lung epithelial permeability by the pulmonary clearance of 99mTc-DTPA

A taxa de depuraçäo pulmonar do 99mTc-DTPA constitui um índice da permeabilidade epitelial pulmonar. O interesse crescente nesta técnica diagnóstico decorre de sua natureza näo-invasiva, da facilidade de repetiçöes das medidas, de seu relativo baixo custo e, principalmente, de sua elevada sensibilidade em detectar precocemente a lesäo pulmonar. Este artigo revisa os princípios básicos e as aplicaçöes desta técnica, procurando dar ênfase a seu uso como método diagnóstico na prática clínica

Cuerpos de Leuchtenberger (cuerpos apoptóticos) en adenomas de intestino grueso / Leuchtenberger bodies (apoptotic bodies) in adenomas of the large bowel

En 1954 Leuchtenberger describió unos cuerpos de inclusión de 1 a 2 micras de diámetro, que se tiñen con la técnica de Feulgen, en el citoplasma de las células epiteliales de pólipos rectales. Rubio y col mencionaron que el hallazgo de numerosos cuerpos de Leuchtenberger (CL) en adenomas colo-rectales debe hacer sospechar una poliposis múltiple familiar(PMF). El objetivo de este trabajo fue conocer la frecuencia de los CL en los adenomas tubulares de la PMF y compararla con la frecuencia observada en adenomas no familiares y otras lesiones hiperplásicas e inflamatorias del tubo digestivo. Los CL fueron más frecuentes en al PMF (88 por ciento) y los adenomas papilares 75 por ciento) que en los pólipos tubulares no familiares (38 por ciento), los pólipos hiperplásicos del estómago (45 por ciento), los pólipos inflamatorios de colon (45 por ciento) y la colitis ulcerosa inespecífica (12 por ciento). Aunque el hallazgo de numeros CL es más común en la PMF que en pólipos tubulares no familiares (p<0.0001), la ausencia de estas partículas en un adenoma no descarta la posibilidad de una PMF. Por sus caracteres histológicos, histoquímicos y ultraestructurales sugiere que los CL corresponden a cuerpos apoptóticos que se forman probablemente por necrosis de las células epiteliales

Influence of lectins on adhesion of streptococcus salivarius to buccal epithelial cells

Foi verificada a influência do pré-tratamento de células epiteliais bucais com preparaçöes purificadas de lectinas extraídas de alimentos na adesäo de S. salivarius. Todas as lectinas promoveram um aumento do número de células aderidas, com exceçäo da lectina de batata, sugerindo que lectinas derivadas da dicta podem desempenhar importante papel na colonizaçäo de S. salivarius

GPI-anchored proteins and detergent-resistant membrane domains

Glycosylphosphatidylinositol (GPI)-anchored proteins are expressed on the apical surface of polarized epithelial cells. The anchor may act as an apical sorting signal by associating with clusters or rafts of apically directed glycosphingolipids (GLS). We have previously shown that endogenous GPI-anchored proteins and stably transfected placental alkaline phosphatase (PLAP) can be isolated from detergent lysates of cultured epithelial cells in association with a detergent-insoluble membrane that is rich in GSL. Here, we investigate the behavior of a hybrid GPI-anchored protein, GThy, that contains the ectodomain of the vesicular stomatitis virus glycoprotein (VSV-G) and a GPI-anchor from the Thy1 protein. We have previously shown that GThy is efficiently (85-90 percent) targeted to the apical surface of MDCK cells. Here we show that the protein also becomes insoluble in Triton X-100 as it moves through the secretory pathway of these cells. However, the degree of Triton X-100 insolubility is never as great as that seen for PLAP. This may result from the fact that it is an engineered protein, as the same behavior has been reported for another hybrid GPI-anchored protein. In addition, GThy is rapidly lost from MDCK cells by release into the media, with a t1/2 of about 50 min. This turnorver appears to be mediated by a cell-surface protease that may recognize viral glycoproteins

Glycosphingolipid clusters and the sorting of GPI-anchored proteins in epithelial cells

We studied the role of the association between glycosylphosphatidylinositol (GPI)-anchored proteins and glycosphingolipid (GSL) clusters in apical targeting using gD1-DAF, a GPI-anchored protein that is sorted differentially by three epithelial cell lines. Differently from MDCK cells, where both gD1-DAF and glucosylceramide (GlcCer) are sorted to the apical membrane, in MDCK Concanavalin A-resistant cells (MDCK-ConAr) gD1-DAF was mis-sorted to both surfaces but GlcCer was still targeted to the apical surface. In both MDCK and MDCK-ConAr cells, gD1-DAF became associated with TX-100 insoluble GSL clusters during transport to the cell surface. In contrast to MDCK cells, the Fischer rat thyroid (FRT) cell line targeted both gD1-DAF and GlcCer basolaterally. Both MDCK and FRT cells had the ability to assemble GSLs into TX-100-insoluble complexes, but, surprisingly, in FRT cells, gD1-DAF did not associate with GSLs and, therefore, remained completely soluble in TX100. This clustering defect in FRT cells correlated with the absence of VIP21/caveolin, a protein localized to both the plasma membrane caveolae and the TGN. This suggests that VIP21/caveolin may have an important role in recruiting GPI-anchored proteins into GSL complexes, necessary for their apical sorting. However,since MDCK-ConAr cells expressed caveolin and clustered GPI-anchored proteins normally, yet mis-sorted them, our results also indicate that clustering and caveolin are not sufficient for apical targeting and that additional factors are required for the accurate apical sorting of GPI-anchored proteins

Aspectos morfológicos, morfométricos e citoquímicos da parede duodenal de ratos com diferentes idades / Morphologic, morphometric and cytochemical aspects in the duodenal wall in rats with differents ages

Foram analisados as características morfológicas, morfométricas e citoquímicas ocorridas na parede duodenal de ratos com 3, 12 e 24 meses de idade. A conservaçao morfológica encontrou-se a existência de 2 padroes. O primeiro envolvendo animais de 3 a 12 meses e o segundo composto pelos animais de 24 meses. A morfometria evidenciou um aumento progressivo do número de células caliciformes, com envelhecimento do animal, e mais, o conteúdo de mucina destas células sofreu gradativa acidificaçao com decorrer da idade. Nao se observou alteraçao no índice mitótico nos 3 grupos de animais.

A rapid giemsa technique for demonstrating the x-chromatin

A rapid giemsa staining technique for the x-chromatin; using buccal mucosa epithelium is described. Indeed various stains and staining techniques for visualization of the x-chromatin in different body tissues have been described. But the giemsa staining techniques is compatible with expected results from buccal mucosa epithelium